Es la primera empresa que obtiene la mención de acreditado para la cuantificación de células viables de Brettanomyces bruxellensis
La Entidad Nacional de Acreditación (ENAC) ha concedido a Laboratorios Excell Ibérica la acreditación para la cuantificación de Brett por citometría de flujo y marcaje con sondas Fish, siendo la primera empresa que obtiene la mención de acreditado para la cuantificación de células viables de Brettanomyces bruxellensis.
La detección y cuantificación de Brettanomyces bruxellensis al final de la fermentación alcohólica y durante la crianza del vino es de gran interés para la gran mayoría de las bodegas, dado que esta levadura es capaz de alterar el bouquet y el paladar de los vinos mediante la producción de compuestos denominados fenoles volátiles.
La base metodológica detrás de esta técnica radica en separar las células de levaduras, que de manera natural se encuentran agrupadas, para hacerlas pasar por un capilar capaz de contabilizar de una en una con un detector específico de fluorescencia. Además, gracias a los últimos avances en biología molecular, esta técnica se acopla a la detección de RNA 26s ribosomal mediante sondas FISH, lo que por una parte ofrece la detección inequívoca, entre otras levaduras, de Brettanomyces brullexensis, pero además, estas sondas genéticas son marcadores únicos de células viables, dado que las células que no son activas metabólicamente, no producen RNA.
Siendo la primera empresa que obtiene la mención de acreditado para la cuantificación de células viables de Brettanomyces bruxellensis, el laboratorio ha realizado una profunda validación acorde a la normativa UNE-EN ISO 16140-4:2021 con validación de métodos internos.
Dentro de este proceso de validación, el laboratorio, en colaboración con el fabricante de soluciones analíticas de diagnóstico Sysmex, la Universidad de La Rioja y el INCAVI, ha realizado un profundo estudio sobre la variabilidad fisiológica y genética de diferentes cepas de esta levadura. Para ello, ha estudiado más de 50 cepas de Brettanomyces bruxellensis procedentes de viñedos y diferentes puntos del proceso de elaboración y crianza de diversas Denominaciones de Origen. El objetivo fue evaluar la sensibilidad e inclusividad de la técnica y evitar posibles falsos negativos. De esta manera se asegura que la sonda esté adaptada a las diferentes cepas y estadios fisiológicos de esta levadura contaminante.
Paralelamente, el laboratorio ha realizado un ensayo de exclusividad acorde a la norma ISO 16140, que asegura la ausencia de falsos positivos. Para ello se han analizado más de 30 cepas de levaduras de diferentes géneros y especies adaptadas al ecosistema vitivinícola. El objetivo fue asegurar la ausencia de reactividad cruzada cuando se analicen vinos donde existan otras poblaciones de levaduras, como finales de fermentación alcohólica, vinos sin filtrar, segundas fermentaciones en botella, etc.
Recientemente, la técnica de citometría de flujo se ha posicionado en el mercado como una alternativa competitiva y real para la detección y recuento de esta levadura contaminante. Por una parte, es tan rápida como otras técnicas de biología molecular, pero su coste es inferior dada la automatización y el tipo de reactivos.
Laboratorios Excell Ibérica resume así las principales aplicaciones enológicas de esta técnica:
- Identificación y cuantificación de células activas de levaduras contaminantes Brettanomyces.
- Verificación de la eliminación de Brettanomyces tras la aplicación de tratamientos curativos o ajuste de los niveles de sulfuroso.
- Estado libre de contaminación de un pie de cuba de levaduras.
- Evaluación de posibles contaminantes al final de la fermentación alcohólica.
- Control higiénico del parque de barricas durante la crianza.
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